Sulf-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403277

概要

SULF2はSulf-2（細胞外エンドスルファターゼ）をコードしており、ヘパラン硫酸プロテオグリカンから6-O-硫酸基を選択的に除去することで、リガンドの利用可能性や受容体結合を制御する「硫酸化コード」を再構築します。Sulf-2は細胞表面および細胞周辺マトリックスにおけるヘパラン硫酸を編集し、FGF、WNT、VEGFなどの経路からのシグナル出力を調節して、細胞増殖、遊走、分化、接着に影響を与えます。SULF2発現の変化とヘパラン硫酸リモデリングは、腫瘍微小環境の制御、浸潤性挙動、血管新生応答と関連づけられており、線維化や炎症過程にも関与します。これらの機能により、SULF2は細胞外マトリックス依存的シグナル伝達や、グリコサミノグリカンを介した細胞間コミュニケーションの制御を解明するための有用な標的となります。

Sulf-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSULF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SULF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SULF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sulf-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sulf-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SULF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sulf-2の機能に不可欠なSULF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SULF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sulf-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSulf-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SULF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sulf-2 HDRプラスミド（h）および Sulf-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSULF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSULF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。