Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Stat3: sc-400027-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Stat3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Stat3 (h) y el plásmido de doble nickasa Stat3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STAT3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Stat3 Anticuerpo (F-2): sc-8019
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Stat3 | sc-400027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Stat3 | sc-400027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT3 codifica Stat3, un factor de transcripción citoplasmático latente que se activa aguas abajo de los receptores de citocinas y de factores de crecimiento, de forma destacada a través de quinasas JAK. Tras su fosforilación, Stat3 dimeriza y se transloca al núcleo para regular programas génicos que controlan la proliferación, la supervivencia, la diferenciación, la inflamación y la evasión inmunitaria, con intercomunicación (cross-talk) con las vías de señalización MAPK y PI3K–AKT. La actividad de STAT3 se encuentra con frecuencia desregulada en la biología del cáncer, en estados inflamatorios crónicos y en trastornos inmunomediados, y se utiliza ampliamente como un nodo para estudiar el control transcripcional de la señalización por citocinas. En células humanas, las salidas dependientes de STAT3 incluyen respuestas de fase aguda, polarización de células T y redes transcripcionales asociadas a la transición epitelio-mesénquima.
Stat3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STAT3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STAT3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STAT3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STAT3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.