Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) SREBP-1: sc-423152-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SREBP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SREBP-1 Double Nickase (m) et le plasmide SREBP-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Srebf1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SREBP-1 Antibody (A-4): sc-365513
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SREBP-1 | sc-423152-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Srebf1** code la protéine 1 de liaison aux éléments régulateurs des stérols (**SREBP-1**), un facteur de transcription ancré à la membrane qui est activé par protéolyse afin de déclencher des programmes géniques lipogéniques. SREBP-1 coordonne la synthèse des acides gras et des triglycérides en régulant des enzymes telles que **ACACA**, **FASN** et **SCD1**, en intégrant les signaux liés aux nutriments, à l’insuline et à **mTOR** avec la détection des lipides au niveau du réticulum endoplasmique. En contrôlant la biogenèse membranaire et le stockage énergétique, SREBP-1 influence l’adipogenèse, l’accumulation lipidique hépatique et la gestion des lipides par les macrophages. Une activité dérégulée de **Srebf1/SREBP-1** est fréquemment étudiée dans des modèles de syndrome métabolique, de résistance à l’insuline, de stéatose hépatique non alcoolique, ainsi que dans les aspects lipido-dépendants de la croissance oncogénique.
SREBP-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Srebf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Srebf1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Srebf1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Srebf1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.