SREBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423152

概要

Srebf1は、ステロール調節エレメント結合タンパク質1（SREBP-1）をコードしており、膜に係留された転写因子として存在し、タンパク質分解による活性化を受けて脂質および炭水化物代謝プログラムを制御します。マウス細胞では、SREBP-1がde novo脂肪酸合成およびトリグリセリド合成に必要な酵素の発現を促進し、SREBP依存的な転写制御を介して、栄養状態やホルモンシグナルを脂質合成関連遺伝子ネットワークに結び付けます。この経路はインスリンおよびmTORシグナル、ER（小胞体）恒常性、膜生合成と統合され、脂肪細胞分化や肝細胞の代謝リモデリングに影響を与えます。SREBP-1活性の制御不全は、肝脂肪化、肥満に伴うインスリン抵抗性、脂質駆動性炎症のモデルにおいて、機序を説明する主要な軸として広く用いられています。

SREBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSrebf1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Srebf1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Srebf1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SREBP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SREBP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Srebf1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SREBP-1の機能に不可欠なSrebf1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Srebf1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SREBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSREBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Srebf1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SREBP-1 HDRプラスミド（m）および SREBP-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSrebf1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSrebf1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。