Sp1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423094

概要

Sp1（specificity protein 1）は、広く発現する亜鉛フィンガー型転写因子であり、GCリッチなプロモーター配列に結合して、多様な遺伝子プログラムにわたる基礎転写および誘導性転写を制御する。マウス細胞では、Sp1はMAPK/ERK、PI3K/AKT、ならびにストレス応答性経路からのシグナル入力を統合し、細胞周期進行、DNA損傷応答、クロマチン再構成、代謝恒常性を協調的に調整する。さらに、p300/CBPやHDAC複合体などの共調節因子との相互作用を介して、増殖、アポトーシス、分化に関与する遺伝子の転写出力を形作る。Sp1活性の破綻は、がん性転写ネットワーク、炎症性シグナル伝達、神経変性に伴う遺伝子発現変化に関与するとされており、転写制御機構の研究における重要なハブ分子である。

Sp1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sp1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sp1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sp1の機能に不可欠なSp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sp1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSp1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sp1 HDRプラスミド（m）および Sp1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。