Sox-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406693

概要

SOX8は転写因子Sox-8をコードしており、Sox-8はSOX（SRY関連HMGボックス）ファミリーに属し、HMGドメインを介してDNAに結合して系譜決定や分化プログラムを制御します。Sox-8は、補因子やクロマチンとの状況依存的な相互作用を通じて、神経堤由来細胞、グリア細胞およびオリゴデンドロサイトの発生、さらに性腺や骨格の生物学的過程の一部を制御する転写ネットワークに関与します。細胞運命の決定、増殖、細胞外マトリックスのリモデリングに関連する遺伝子発現プログラムを調節することで、SOX8は発生経路および組織恒常性に寄与します。SOX8の発現異常やSOXファミリー回路の変化は、腫瘍性の転写状態や発生異常と関連付けられており、疾患関連の遺伝子制御機構を解明する研究において重要であることが示唆されます。

Sox-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSOX8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SOX8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SOX8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Sox-8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Sox-8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SOX8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Sox-8の機能に不可欠なSOX8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SOX8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sox-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSox-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SOX8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sox-8 HDRプラスミド（h）および Sox-8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSOX8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSOX8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。