SNAP47 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410264

Visão geral

O SNAP47 codifica uma proteína da família dos receptores SNAP (SNARE) que participa no ancoramento de vesículas e na fusão de membranas ao interagir com sintaxinas e VAMPs correspondentes, regulando a exocitose e o tráfego do sistema endomembranar. Ele tem sido implicado em vias secretórias especializadas, incluindo a liberação de neurotransmissores e a entrega regulada de cargas, associando a atividade de SNAP47 ao ciclo de vesículas sinápticas, à reciclagem de membrana e ao controle espacial da localização de proteínas. Por meio de seu papel na dinâmica do complexo SNARE, o SNAP47 influencia processos celulares como o crescimento de neuritos, o tráfego de receptores e a secreção acoplada a estímulos. A desregulação do tráfego vesicular e da sinalização sináptica é relevante em contextos de pesquisa neurodo desenvolvimento e neurodegenerativa, tornando o SNAP47 um alvo útil para investigar fenótipos dependentes de transporte.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SNAP47 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SNAP47 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SNAP47, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SNAP47 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SNAP47.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SNAP47 para a investigação da sinalização de SNAP47, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SNAP47 críticos para a função SNAP47
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SNAP47 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SNAP47 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SNAP47 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SNAP47. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SNAP47 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SNAP47 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SNAP47 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SNAP47 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.