Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Smad3 Antibody (38-Q): sc-101154. Western blot analysis of Smad3 expression in human colon tissue extract.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Smad3双切口酶质粒(h): sc-400069-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Smad3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Smad3双切酶质粒（h）和Smad3双切酶质粒（h2）编码针对SMAD3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Smad3: sc-101154，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Smad3双切口酶质粒(h) | sc-400069-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Smad3双切口酶质粒(h2) | sc-400069-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMAD3 编码 Smad3 蛋白，后者是一种信号转导与转录调控因子，介导受体丝氨酸/苏氨酸激酶下游的经典 TGF-β/Activin 信号通路。其 C 端被磷酸化后，Smad3 与 SMAD4 形成复合物并转位入核，调控与细胞周期阻滞、细胞外基质重塑、分化以及免疫调节相关的基因表达。Smad3 的活性还会与 MAPK、PI3K/AKT 和 Wnt 等通路发生整合，从而塑造依赖具体情境的转录输出及反馈调控。SMAD3 信号失调与纤维化、肿瘤进展及炎症性疾病机制相关，因此在人体细胞模型中常被用作通路解析的研究靶点。
Smad3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SMAD3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SMAD3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SMAD3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SMAD3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。