Smad2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400475-NIC

O gene humano **SMAD2** codifica a Smad2, uma SMAD regulada por receptor que transduz sinais de TGF-β e activina/NODAL de receptores do tipo I até o núcleo, onde se associa à **SMAD4** para modular programas transcricionais que controlam a regulação do ciclo celular, a diferenciação, a remodelação da matriz extracelular e a sinalização imune. A atividade de Smad2 é moldada pela fosforilação na extremidade C-terminal, pelo transporte núcleo-citoplasmático e pela comunicação cruzada com as vias **MAPK** e **PI3K/AKT**, integrando sinais contextuais de crescimento e de estresse. A desregulação da sinalização de SMAD2 tem sido implicada em alterações na dinâmica epitélio–mesênquima, na remodelação fibrótica, em estados transcricionais associados à inflamação e na biologia tumoral por meio da perturbação das saídas canônicas da via de TGF-β. Como um nó central na sinalização da superfamília TGF-β, **SMAD2** é frequentemente estudado para dissecar a arquitetura da via, a montagem de complexos transcricionais e as respostas de redes gênicas a jusante.

Smad2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMAD2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMAD2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMAD2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMAD2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.