SLC6A15 Double Nickaseプラスミド (h): sc-410592-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- SLC6A15 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- SLC6A15ダブルニカースプラスミド（h）およびSLC6A15ダブルニカースプラスミド（h2）は、SLC6A15を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
SLC6A15 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-410592-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC6A15は、ナトリウムおよび塩化物依存性の中性アミノ酸トランスポーター（B0AT2）をコードし、分岐鎖アミノ酸を含む中性アミノ酸の細胞内への取り込みを調節することで、細胞内アミノ酸の利用可能性や代謝恒常性に影響を与えます。タンパク質合成およびエネルギー代謝の基質フラックスを形作ることにより、SLC6A15は栄養感知プログラムや、アミノ酸供給に応答する下流のシグナル伝達ネットワークに関与します。発現は神経系で高く、神経細胞の代謝適応やシナプス生理との関連が示されています。SLC6A15の制御異常は、ストレス関連の神経生物学や神経精神疾患様表現型を扱う研究で報告されており、脳代謝の機序研究における重要性を支持しています。
SLC6A15 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における SLC6A15 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、SLC6A15内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、SLC6A15の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、SLC6A15が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。