SLC26A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403891

概要

SLC26A3は、上皮細胞の頂端膜（アピカル面）で電気的に中性なCl⁻/HCO₃⁻交換を担う膜型アニオン交換輸送体（DRAとも呼ばれる）をコードしており、腸管における水分・電解質吸収に重要な役割を果たします。SLC26A3は、重炭酸の分泌と塩化物の取り込みを調節することで、管腔内pHの制御や、CFTR依存的なイオン輸送および粘膜の恒常性と連関する上皮輸送過程に寄与します。SLC26A3の破綻や発現・機能の異常は、先天性塩化物下痢症に関連するほか、消化管における上皮バリア機能や炎症性シグナルに関わるより広範な表現型とも関連づけられています。そのため、SLC26A3の発現と活性は、上皮分化、輸送生理、ならびに炎症に伴う腸管微小環境のリモデリングを研究する上で重要です。

SLC26A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC26A3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC26A3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC26A3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC26A3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC26A3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC26A3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC26A3の機能に不可欠なSLC26A3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC26A3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC26A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC26A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC26A3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC26A3 HDRプラスミド（h）および SLC26A3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC26A3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC26A3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。