SLC13A5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407118

概要

SLC13A5は、ナトリウム依存性クエン酸トランスポーター（NaCT）をコードしており、細胞外から細胞内へのクエン酸取り込みを担うことで、細胞外のクエン酸利用可能性を細胞内の炭素フラックスに結び付けます。細胞質のクエン酸プールに影響を与えることで、SLC13A5はde novo脂肪合成やタンパク質アセチル化に必要なアセチルCoA産生を支え、解糖系、TCA回路のアナプレロシス、酸化還元バランスを統合して制御するエネルギー感知ネットワークを調節し得ます。SLC13A5の活性は、代謝が活発な組織やニューロンで特に研究が進んでおり、クエン酸輸送はミトコンドリア代謝や、アセチル化依存的な経路を介したエピジェネティック制御と交差します。SLC13A5の遺伝学的攪乱は、神経代謝機能障害や脂質・グルコース恒常性の変化と関連づけられており、代謝および神経表現型の機序研究において重要です。

SLC13A5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC13A5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC13A5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC13A5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC13A5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC13A5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC13A5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC13A5の機能に不可欠なSLC13A5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC13A5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC13A5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC13A5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC13A5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC13A5 HDRプラスミド（h）および SLC13A5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC13A5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC13A5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。