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Siglec-9慢病毒激活颗粒(h) | sc-406675-LAC | 200 µl | $455.00 |
SIGLEC9 编码 Siglec-9,这是一种具有抑制作用的唾液酸结合型免疫球蛋白样凝集素,主要表达于中性粒细胞、单核细胞以及部分 NK 细胞亚群。Siglec-9 通过依赖 ITIM 的信号传导并招募 SHP-1/2 等磷酸酶,抑制激活性受体通路,从而在识别唾液酸化的自身相关分子模式(self-associated molecular patterns)的背景下,调控白细胞的激活状态、细胞因子输出和细胞毒性反应。这种类似免疫检查点的调控会影响细胞间相互作用、黏附以及在黏膜与肿瘤相关微环境中的炎症消退过程。SIGLEC9 活性失调与先天免疫监视改变及炎症表型相关,因此也支持其在免疫逃逸机制以及髓系/NK 细胞功能极化研究中的重要性。
Siglec-9 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SIGLEC9 表达。
Siglec-9 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SIGLEC9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Siglec-9表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SIGLEC9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。