Seipin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406865-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SeipinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Seipin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Seipin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BSCL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Seipin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Seipin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O BSCL2 humano codifica a seipina, uma proteína de membrana do retículo endoplasmático que organiza a biogênese de gotículas lipídicas e promove o armazenamento adequado de triacilgliceróis por meio da coordenação de sítios de contato entre o RE e as gotículas lipídicas. A seipina influencia a diferenciação de adipócitos e vias de homeostase lipídica, conectando a síntese de lipídios neutros, a remodelação de fosfolipídios e a dinâmica de membranas de organelas. A disrupção de BSCL2 altera a morfologia das gotículas lipídicas e o balanço energético celular, com relevância estabelecida para a lipodistrofia congênita generalizada e para fenótipos neurodegenerativos associados à seipina, incluindo neuropatia motora hereditária distal e distúrbios relacionados. Essas conexões tornam o BSCL2 um nó útil para estudar metabolismo lipídico, respostas ao estresse de proteostase e vulnerabilidade específica de tipos celulares.
Seipin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BSCL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BSCL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BSCL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BSCL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.