Plasmide Double Nickase (h) SDHC: sc-405559-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SDHC correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SDHC Double Nickase (h) et le plasmide SDHC Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SDHC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SDHC Antibody (C-2): sc-515102
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SDHC | sc-405559-NIC | 20 µg | $410.00 |
SDHC code la sous-unité C du complexe succinate déshydrogénase ancrée à la membrane, un composant essentiel du complexe II mitochondrial qui relie le cycle de l’acide tricarboxylique (cycle de Krebs, TCA) à la chaîne de transport d’électrons en permettant l’oxydation du succinate et le transfert d’électrons vers l’ubiquinone. En tant qu’élément d’ancrage dans la membrane interne mitochondriale, SDHC contribue à stabiliser l’assemblage du complexe II et permet une phosphorylation oxydative efficace, influençant l’équilibre rédox cellulaire et la gestion des espèces réactives de l’oxygène. Une perturbation de SDHC peut altérer la respiration mitochondriale et favoriser l’accumulation de succinate, avec des effets en aval sur la signalisation métabolique et la régulation épigénétique via une modification de l’activité des dioxygénases dépendantes de l’α-cétoglutarate. Des altérations de SDHC sont associées à un dysfonctionnement mitochondrial et ont été impliquées dans la biologie des paragangliomes/phéochromocytomes héréditaires, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la reprogrammation métabolique et des voies de réponse au stress.
SDHC Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SDHC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SDHC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SDHC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SDHC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.