SCO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402686

概要

SCO2は、COX2サブユニットへ銅を供給してシトクロムcオキシダーゼ（複合体IV）の生合成を担い、呼吸鎖のアセンブリを支える、ミトコンドリア内膜関連のメタロシャペロンをコードしています。酸化的リン酸化における役割を通じて、SCO2はミトコンドリア膜電位、ATP産生、レドックス恒常性の維持に寄与し、細胞のエネルギー代謝やストレス応答と結び付いています。SCO2の機能障害は複合体IV活性を低下させ、細胞を代謝状態の変化へと傾ける可能性があり、活性酸素種（ROS）の処理やアポトーシス感受性などの過程に影響します。ヒトSCO2の病的バリアントは重篤なミトコンドリア脳心筋症表現型や心筋症と関連しており、ミトコンドリア疾患の機序を研究するうえで重要な標的となります。

SCO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSCO2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SCO2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SCO2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SCO2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SCO2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SCO2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SCO2の機能に不可欠なSCO2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SCO2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SCO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSCO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SCO2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SCO2 HDRプラスミド（h）および SCO2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSCO2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSCO2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。