Sclerostin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401527-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SclerostinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sclerostin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sclerostin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SOST. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sclerostin Anticorpo (C-11): sc-518161
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sclerostin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401527-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sclerostin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401527-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOST codifica a esclerostina, uma glicoproteína secretada produzida predominantemente por osteócitos que atua como um importante inibidor extracelular da sinalização canônica Wnt/β-catenina ao se ligar aos correceptores LRP5/6 e limitar a diferenciação e a atividade dos osteoblastos. Por meio da modulação da sinalização Wnt e do “crosstalk” com as vias de BMP, a esclerostina ajuda a regular a formação e a remodelação óssea, bem como respostas dependentes de mecanotransdução no tecido esquelético. Alterações na expressão ou na função de SOST estão associadas a fenótipos anormais de massa óssea e são frequentemente estudadas no contexto de vias relacionadas à osteoporose, à regulação da densidade óssea e ao desenvolvimento do esqueleto. Além da biologia esquelética, a regulação de Wnt mediada por esclerostina é relevante para estudos mais amplos de destino celular e sinalização extracelular, nos quais o “tônus” da via Wnt influencia programas de proliferação e diferenciação.
Sclerostin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SOST em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SOST. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SOST. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SOST interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.