RXRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422768

概要

RxrbはレチノイドX受容体β（RXRβ）をコードする、リガンド依存性に活性化される核内受容体です。RXRβはPPAR、LXR、FXR、VDR、RARなど複数のパートナーとヘテロ二量体を形成し、脂質・糖代謝、細胞分化、炎症シグナル伝達を制御する転写プログラムを調節します。RXRβはレチノイドや脂質由来のシグナルを統合し、応答配列上でのクロマチン関連転写を調節することで、代謝活性の高い組織におけるミトコンドリア機能や酸化還元バランスに影響を与えます。マウスモデルでは、Rxrb活性の変化が代謝恒常性の破綻や免疫調節の異常と関連づけられており、脂肪肝、インスリン感受性、炎症性疾患の機序研究において重要です。さらに、核内受容体間のクロストークにおける中心的役割から、発生や内分泌シグナル伝達における経路相互作用を解析するための要所（ノード）としても位置づけられます。

RXRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRxrb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rxrb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rxrbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RXRβタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RXRβシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rxrb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RXRβの機能に不可欠なRxrbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rxrbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RXRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRXRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rxrb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RXRβ HDRプラスミド（m）および RXRβ HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRxrbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRxrb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。