ROR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424100

概要

Ror2は、受容体型チロシンキナーゼ様オーファン受容体2（ROR2）をコードする遺伝子であり、膜受容体として主に非カノニカルWNTシグナル伝達における共受容体として機能します。とりわけWNT5Aへの応答で重要です。ROR2は、JNK/AP-1やRhoファミリーGTPアーゼシグナル伝達などを含む下流経路を介して、平面内細胞極性、細胞骨格ダイナミクス、および方向性のある細胞移動を制御します。マウスの発生生物学においてRor2活性は、骨格形態形成、四肢のパターニング、ならびに組織の配置に影響するため、分化や形態形成シグナルを研究する上で重要な結節点となっています。ROR2関連シグナルの破綻は、疾患に関連する状況での異常な細胞運動性や浸潤性表現型と結び付けられており、経路および表現型の解析における機構的な手がかりとしての有用性を支持します。

ROR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRor2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ror2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ror2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ROR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ROR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ror2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ROR2の機能に不可欠なRor2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ror2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ROR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびROR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ror2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ROR2 HDRプラスミド（m）および ROR2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRor2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRor2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。