Rock-2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422695-LAC

マウスRock2は、Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2（ROCK2）をコードしており、RhoAの下流で機能するセリン／スレオニンキナーゼです。ROCK2はアクトミオシン収縮性、フォーカルアドヒージョンのダイナミクス、ならびに細胞骨格のリモデリングを制御します。ROCK2はMYL2/MLCやLIMKなどの基質のリン酸化を調節し、RhoA–ROCK–ミオシン経路およびLIMK–コフィリン経路を介して、細胞形態、細胞運動、細胞質分裂、機械刺激のシグナル伝達（メカノトランスダクション）に影響を与えます。免疫系・血管系・神経系の文脈では、ROCK2シグナルの変調が、炎症応答の破綻、内皮バリア機能の異常、線維化に関連したリモデリング、神経回路の結合性の変化などと関連づけられています。これらの特性により、Rock2は発生や疾患関連の細胞表現型における、細胞骨格依存的なシグナル伝達プログラムを研究する上での重要な結節点となります。

Rock-2 レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なRock2の発現上昇を可能にします。

Rock-2 レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Rock2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Rock-2の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のRock2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。