RIF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408916-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RIF1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RIF1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RIF1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LRIF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RIF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RIF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O RIF1 humano (replication timing regulatory factor 1) é uma proteína associada à cromatina que coordena a escolha da via de reparo de quebras de dupla fita do DNA e a regulação das origens de replicação. Atua a jusante da sinalização de dano para promover a junção de extremidades não homólogas (NHEJ), antagonizando a ressecção das extremidades do DNA, e contribui para o timing de replicação e a estabilidade das forquilhas durante a fase S. Por meio dessas funções, o RIF1 influencia a integridade do genoma, processos associados aos telômeros e respostas celulares ao estresse replicativo. A desregulação de vias ligadas ao RIF1 é frequentemente estudada em contextos de instabilidade cromossômica e capacidade alterada de reparo do DNA observadas em múltiplos modelos relevantes para doenças.
RIF1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LRIF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LRIF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LRIF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LRIF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.