Ribosomal Protein L39 Double Nickaseプラスミド (h): sc-410990-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Ribosomal Protein L39 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Ribosomal Protein L39ダブルニカースプラスミド（h）およびRibosomal Protein L39ダブルニカースプラスミド（h2）は、RPL39を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Ribosomal Protein L39 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-410990-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ribosomal Protein L39 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-410990-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトRPL39は、60Sリボソーム大サブユニットを構成する小型で塩基性のリボソームタンパク質L39をコードしており、リボソームの組み立てやmRNAの安定した翻訳に寄与します。翻訳装置の中核として、RPL39はタンパク質合成能、共翻訳的な品質管理、さらに増殖・ストレス応答・プロテオスタシスに関連するより広範な細胞プログラムに影響を与えます。リボソームタンパク質の攪乱は核小体ストレスを誘導し、p53依存性チェックポイントを含む下流シグナルの変化を引き起こし得るほか、特定転写産物に対する翻訳選択性を変化させる可能性があります。リボソーム生合成および機能の異常は、リボソーム病やがんに関連した翻訳リプログラミングに広く関与していることから、RPL39は、リボソーム組成の変化が細胞状態や疾患関連表現型に及ぼす影響を研究するうえで重要な標的となります。
Ribosomal Protein L39 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における RPL39 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、RPL39内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、RPL39の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、RPL39が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。