RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423946

概要

Rgs7は、Gタンパク質シグナル制御因子7（RGS7）をコードしており、Gαi/oを介したGTP加水分解を促進してGPCRシグナル伝達を終結させるGAPです。RGS7はGβ5およびR7BPとの複合体を介して神経系で顕著に機能し、受容体によるアデニル酸シクラーゼ/cAMPシグナル、イオンチャネル活性、シナプス伝達の調節を形成します。神経伝達物質応答の振幅と持続時間を制限することで、RGS7は神経細胞の興奮性、可塑性、ならびに回路レベルのシグナル出力に影響を与えます。RGS7に関連する経路の機能異常は、遺伝学的研究および機能解析において神経行動学的・神経精神医学的表現型と関連付けられており、機構的神経科学研究における重要性が示唆されています。

RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRgs7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rgs7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rgs7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RGS7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RGS7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rgs7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RGS7の機能に不可欠なRgs7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rgs7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rgs7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RGS7 HDRプラスミド（m）および RGS7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRgs7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRgs7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。