Plasmide Double Nickase (h) RGS6: sc-404102-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RGS6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RGS6 Double Nickase (h) et le plasmide RGS6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RGS6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RGS6 | sc-404102-NIC | 20 µg | $410.00 |
RGS6 (Regulator of G protein signaling 6) est une protéine activatrice de la GTPase qui atténue la signalisation des RCPG en accélérant l’hydrolyse du GTP médiée par Gαi/o, modulant ainsi l’amplitude et la durée des voies des protéines G hétérotrimériques. En modulant des réseaux de seconds messagers tels que l’AMPc/PKA et la signalisation MAPK en aval, RGS6 contribue au contrôle de l’excitabilité cellulaire, des réponses au stress et de signaux de survie dépendants du contexte. RGS6 a été associée à la régulation des voies dopaminergiques et cholinergiques, et a été étudiée dans des processus pertinents pour la neurobiologie et la physiologie cardiovasculaire. Des altérations de l’expression ou de la fonction de RGS6 ont été liées à des phénotypes associés à des maladies, notamment une signalisation arythmogène, des caractéristiques neuropsychiatriques et des voies impliquées dans le cancer, ce qui souligne son intérêt pour les études mécanistiques.
RGS6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RGS6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RGS6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RGS6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RGS6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.