RFX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406040

Visão geral

RFX2 (fator regulador X2) é um fator de transcrição do tipo hélice-alada que se liga a motivos X-box e coordena programas de expressão gênica necessários para a ciliogênese e para a função de cílios móveis. Em células humanas, o RFX2 regula redes que controlam o ancoramento do corpo basal, a montagem do axonema e o transporte intraflagelar, ligando-o ao acoplamento entre ciclo celular e cílios e à diferenciação epitelial. A desregulação de circuitos transcricionais da família RFX tem sido associada a defeitos do desenvolvimento relacionados a cílios e a fenótipos reprodutivos consistentes com prejuízo na biogênese de cílios móveis e flagelos. Como regulador transcricional a montante de múltiplos genes ciliares estruturais e de transporte, o RFX2 é frequentemente estudado em vias que governam a depuração mucociliar, o estabelecimento do padrão esquerda-direita e a expressão gênica relevante para a espermatogênese.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RFX2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RFX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RFX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RFX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RFX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RFX2 para a investigação da sinalização de RFX2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RFX2 críticos para a função RFX2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RFX2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RFX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RFX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RFX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RFX2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RFX2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RFX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RFX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.