REEP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432536
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- REEP2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico REEP2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
REEP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432536 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Reep2 codifica a proteína 2 potenciadora da expressão de receptores (REEP2), um membro da família REEP implicada na modelagem das membranas do retículo endoplasmático (RE) e no suporte a interações entre RE e microtúbulos que influenciam o tráfego intracelular. A REEP2 contribui para o processamento de proteínas de membrana e para a organização do RE associada a neuritos, processos importantes para a manutenção da morfologia neuronal e da proteostase. A disrupção das funções da família REEP tem sido associada à vulnerabilidade axonal e a mecanismos neurodegenerativos, tornando o Reep2 um alvo relevante para o estudo de vias que impactam a manutenção dos axônios e as respostas ao estresse. Em sistemas murinos, a perturbação de Reep2 pode ser usada para investigar o remodelamento do RE, a dinâmica de organelos e a sinalização dependente de tráfego em neurônios e em outros tipos celulares secretórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO REEP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Reep2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Reep2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Reep2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína REEP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Reep2 para a investigação da sinalização de REEP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Reep2 críticos para a função REEP2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Reep2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo REEP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo REEP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Reep2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo REEP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR REEP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Reep2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Reep2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.