RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417289

概要

RBM15（RNA binding motif protein 15）はRNA結合性の調節因子であり、選択的スプライシング、mRNAプロセシング、転写産物の運命決定などの転写後制御に関与して、細胞状態の形成に影響を与えます。RBM15はm6A関連の分子機構との相互作用を介してRNA修飾およびエピトランスクリプトーム制御にも関与するとされ、造血や分化に関連するRNA代謝プログラムに影響を及ぼします。さらにRBM15は、発生過程におけるRNAプロセシングと遺伝子発現の出力を結びつける転写・クロマチン関連の文脈でも研究されています。RBM15の制御異常は、血液悪性腫瘍に関連する経路や系譜決定の変化と関連づけられており、疾患生物学におけるRNA中心のメカニズムを検討するうえで有用な標的です。

RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRBM15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RBM15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RBM15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RBM15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RBM15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RBM15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RBM15の機能に不可欠なRBM15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RBM15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RBM15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RBM15 HDRプラスミド（h）および RBM15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRBM15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRBM15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。