Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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RasGRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine): sc-437322
- alvos específicos: bovine
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RasGRP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (bovine) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RasGRP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RasGRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) | sc-437322 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RasGRP1 (proteína 1 de liberação de guanil de RAS) é um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) para Ras, responsivo a diacilglicerol (DAG) e Ca²⁺, que conecta a sinalização da fosfolipase C acionada por receptores à ativação de GTPases da família Ras. Ao promover a troca de GDP por GTP em Ras, RasGRP1 ajuda a propagar a sinalização MAPK/ERK e interage com a dinâmica da via PI3K, moldando programas de ativação, proliferação e diferenciação celular. Em linhagens imunológicas, RasGRP1 é um mediador-chave da sinalização do receptor de antígeno e contribui para os limiares de respostas transcricionais a jusante. A sinalização desregulada de RasGRP1 tem sido associada a alterações da homeostase imune e a contextos de sinalização oncogênica nos quais o controle da via Ras está perturbado, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de transdução de sinais e regulação do destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RasGRP1 (bovine) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares bovine. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RasGRP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de RasGRP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função RasGRP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RasGRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine) e pelo RasGRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (bovine2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RasGRP1 Plasmídeo HDR (bovine) e o Plasmídeo HDR RasGRP1 (bovine2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.