Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rad54 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401750-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad54O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rad54 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rad54 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAD54L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad54 Anticorpo (F-11): sc-374598
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad54 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401750-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad54 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401750-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD54L codifica a ATPase humana Rad54 dependente de DNA, um componente central da recombinação homóloga que remodela a cromatina e promove a invasão de fita mediada por RAD51 durante o reparo de quebras de dupla fita no DNA. A Rad54 atua na rede de reparo de DNA Fanconi anemia/BRCA para sustentar a estabilidade das forquilhas de replicação, facilitar o reparo pós-replicação e preservar a integridade do genoma sob estresse genotóxico. A interrupção de RAD54L perturba a recombinação de alta fidelidade e pode direcionar o reparo para vias propensas a erro, contribuindo para rearranjos cromossômicos e acúmulo de mutações observados na biologia do câncer. Por isso, RAD54L é amplamente utilizado como um ponto de entrada mecanístico para estudar a sinalização da resposta a dano no DNA, a dinâmica da recombinação e os determinantes da instabilidade genômica.
Rad54 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAD54L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAD54L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAD54L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAD54L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.