QTRT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413456-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- QTRT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase QTRT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase QTRT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para QTRT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:QTRT1 Anticorpo (D-7): sc-398918
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
QTRT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413456-NIC | 20 µg | $410.00 |
QTRT1 codifica a subunidade catalítica da tRNA-guanina transglicosilase, que instala queuosina na posição wobble (G34) de tRNAs citosólicos específicos, moldando assim a fidelidade da decodificação de códons e a dinâmica da tradução. Por meio dessa via de modificação de tRNA, QTRT1 contribui para a proteostase e para a adaptação ao estresse celular ao influenciar a precisão e a eficiência da síntese proteica. A desregulação de enzimas de modificação de tRNA, incluindo QTRT1, tem sido associada a programas translacionais alterados ligados a fenótipos de proliferação e resposta ao estresse, o que torna o gene relevante para estudos de biologia de RNA e regulação metabólica. Portanto, QTRT1 é um alvo útil para investigações mecanísticas sobre como modificações na base wobble impactam a expressão gênica no nível da tradução.
QTRT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus QTRT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de QTRT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função QTRT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com QTRT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.