QIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405442-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- QIP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase QIP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase QIP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KPNA4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:QIP1 Anticorpo (3D10): sc-101547
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
QIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405442-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
QIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405442-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KPNA4 codifica a carioferina subunidade alfa 4 (QIP1), um adaptador da família importina-α que reconhece sinais clássicos de localização nuclear e recruta a importina-β para mediar a translocação de proteínas através do complexo do poro nuclear. Ao controlar o tráfego núcleo-citoplasmático, a KPNA4 molda programas transcricionais, a progressão do ciclo celular e a sinalização responsiva ao estresse, regulando o acesso nuclear de fatores de transcrição e proteínas regulatórias essenciais. Alterações na dinâmica de importação nuclear envolvendo KPNA4 têm sido associadas a proliferação desregulada, invasão e vias de manutenção do genoma em contextos relevantes para o câncer, podendo influenciar as respostas celulares a danos no DNA e a estímulos inflamatórios. Como um nó central no transporte nuclear, KPNA4 é frequentemente investigada para dissecar o “mapeamento” de vias que dependem de uma localização nuclear regulada.
QIP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KPNA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KPNA4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KPNA4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KPNA4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.