Plasmide Double Nickase (h) PSD-93: sc-405011-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PSD-93 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PSD-93 Double Nickase (h) et le plasmide PSD-93 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DLG2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PSD-93 | sc-405011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PSD-93 | sc-405011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLG2 code pour la protéine de la densité postsynaptique 93 (PSD-93), une protéine d’échafaudage de la famille des MAGUK, enrichie aux synapses excitatrices, où elle organise les complexes de récepteurs glutamatergiques et les couple aux voies de signalisation en aval. PSD-93 contient des domaines PDZ, SH3 et GK qui coordonnent le trafic et la stabilisation des protéines associées aux récepteurs NMDA/AMPA, modulant ainsi la force synaptique et la plasticité dépendante de l’activité. Par ses interactions au sein de la densité postsynaptique, DLG2 influence la maturation synaptique, la connectivité neuronale et les voies de transduction du signal qui gouvernent le fonctionnement des circuits impliqués dans l’apprentissage. Des études génétiques et fonctionnelles ont associé des altérations de l’expression de DLG2 ou certaines variations du gène à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ce qui en fait un point d’entrée moléculaire pertinent pour disséquer les mécanismes de dysfonction synaptique.
PSD-93 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DLG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DLG2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DLG2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DLG2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.