PSD-93 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405011-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PSD-93O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PSD-93 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PSD-93 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DLG2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PSD-93 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PSD-93 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLG2 codifica a proteína 93 da densidade pós-sináptica (PSD-93), um andaime da família MAGUK enriquecido em sinapses excitatórias, onde organiza complexos de receptores glutamatérgicos e os acopla à sinalização a jusante. A PSD-93 contém domínios PDZ, SH3 e GK que coordenam o tráfego e a estabilização de proteínas associadas aos receptores NMDA/AMPA, moldando a força sináptica e a plasticidade dependente da atividade. Por meio de interações na densidade pós-sináptica, DLG2 influencia a maturação das sinapses, a conectividade neuronal e vias de transdução de sinal que regem o funcionamento de circuitos relacionados à aprendizagem. Estudos genéticos e funcionais associaram alterações na expressão de DLG2 ou variações no gene a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, sustentando seu uso como um ponto de entrada molecular para dissecar mecanismos de disfunção sináptica.
PSD-93 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DLG2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DLG2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DLG2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DLG2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.