PRODH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-405889-KO-2

概要

PRODH2は、プロリンおよびヒドロキシプロリンの分解代謝に関与するミトコンドリア局在のフラビン依存性酸化還元酵素をコードしており、アミノ酸の代謝回転を細胞のレドックスバランスおよびエネルギー代謝に結び付けています。電子伝達反応を呼吸鎖と共役させることで、PRODH2活性は活性酸素種（ROS）の恒常性やストレス下での代謝適応に影響し得ます。プロリン代謝の異常は、さまざまな神経発達および代謝関連の表現型で観察されるミトコンドリア機能やレドックスシグナルの変化と関連付けられてきました。そのためPRODH2は、ミトコンドリア代謝、アミノ酸利用、酸化ストレス応答をつなぐ経路において研究されています。

PRODH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるPRODH2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRODH2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRODH2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRODH2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRODH2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRODH2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRODH2の機能に不可欠なPRODH2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRODH2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRODH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRODH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRODH2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRODH2 HDRプラスミド（h）および PRODH2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRODH2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRODH2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。