Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PP2Cα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422374
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP2Cα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP2Cα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PP2Cα Anticorpo (7F12): sc-517264
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP2Cα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422374 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppm1a codifica a fosfatase proteica 2C alfa (PP2Cα), uma fosfatase de serina/treonina dependente de Mg2+/Mn2+ que atua como reguladora negativa da sinalização ativada por estresse. A PP2Cα modula as vias de MAPK, incluindo as cascatas de p38 e JNK, ao desfosforilar quinases-chave e moldar programas transcricionais a jusante que governam inflamação, apoptose e controle do ciclo celular. Ela também se conecta às respostas a dano no DNA e a estresse metabólico, ajudando a ajustar a duração e a amplitude dos sinais em resposta a estímulos ambientais. A atividade desregulada de PP2Cα tem sido associada à sinalização de estresse aberrante e a fenótipos oncogênicos, o que sustenta seu estudo em biologia tumoral, regulação imune e homeostase celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP2Cα (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppm1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppm1a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppm1a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP2Cα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppm1a para a investigação da sinalização de PP2Cα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppm1a críticos para a função PP2Cα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppm1a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP2Cα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PP2Cα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppm1a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP2Cα Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PP2Cα (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppm1a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppm1a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.