plexin-B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431226

概要

Plxnb2 は、クラス4セマフォリンの膜貫通型受容体である plexin-B2 をコードしており、ガイダンスシグナルを細胞骨格の再構築や細胞運動性と統合します。Plexin-B2 シグナルは Rho ファミリー GTPase の活性に影響を与え、受容体型チロシンキナーゼ経路とも連携して、神経発生および組織構築の過程で接着・遊走・形態形成を協調的に制御します。マウス系では、Plxnb2 の機能は軸索ガイダンス、上皮の分岐形成、発生期および成体組織における細胞間相互作用の制御などの文脈でしばしば研究されています。セマフォリン—プレキシンシグナルの破綻は、疾患関連の状況における異常な遊走や浸潤表現型と関連づけられており、組織アーキテクチャを制御する経路の機構的ハブとしての有用性を示しています。

plexin-B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPlxnb2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Plxnb2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Plxnb2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、plexin-B2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、plexin-B2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Plxnb2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• plexin-B2の機能に不可欠なPlxnb2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Plxnb2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• plexin-B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびplexin-B2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Plxnb2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  plexin-B2 HDRプラスミド（m）および plexin-B2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPlxnb2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPlxnb2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。