PLA1A Double Nickaseプラスミド (h): sc-412191-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- PLA1A Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- PLA1Aダブルニカースプラスミド（h）およびPLA1Aダブルニカースプラスミド（h2）は、PLA1Aを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
PLA1A Double Nickaseプラスミド (h) | sc-412191-NIC | 20 µg | $410.00 |
PLA1A（phospholipase A1 member A）は、ホスファチジルセリンを加水分解してリゾホスファチジルセリンと遊離脂肪酸を産生する、分泌型リゾホスホリパーゼをコードしており、細胞外環境における生理活性脂質メディエーターの組成形成に関与します。リゾホスホリピドシグナル伝達の調節を通じて、PLA1Aは膜リモデリング、脂質代謝フラックス、ならびに炎症や免疫細胞の挙動を制御する受容体依存的経路に影響を与え得ます。PLA1A活性や下流のリゾホスホリピドプロファイルの変化は、炎症制御の破綻や心代謝系の表現型と関連づけられており、動脈硬化、メタボリックシンドローム、および関連する血管生物学の研究における重要性を支持します。循環酵素としてのPLA1Aは、ヒト細胞・組織モデルにおいて内分泌様の脂質シグナル伝達や全身性バイオマーカーを検討する上でも有用です。
PLA1A ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における PLA1A 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、PLA1A内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、PLA1Aの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、PLA1Aが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。