Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PiT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403121
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PiT1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PiT1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PiT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403121 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC20A1 codifica a PiT1, um simportador de fosfato do tipo III dependente de sódio, expresso de forma ubíqua, que regula a captação de fosfato inorgânico para sustentar a síntese de nucleotídeos, a produção de fosfolipídios de membrana e a bioenergética celular. A PiT1 influencia redes de sinalização ligadas à homeostase do fosfato, incluindo ERK/MAPK e o controle do ciclo celular, e está implicada na diferenciação osteogênica e em processos de mineralização por meio de programas transcricionais sensíveis ao fosfato. Alterações na atividade de SLC20A1 têm sido associadas à proliferação desregulada e a respostas ao estresse, sendo frequentemente estudadas no contexto de calcificação vascular, remodelação metabólica e biologia tumoral, em que a disponibilidade de fosfato pode moldar fenótipos de crescimento e sobrevivência.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PiT1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC20A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC20A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC20A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PiT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC20A1 para a investigação da sinalização de PiT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC20A1 críticos para a função PiT1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC20A1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PiT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PiT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC20A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PiT1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PiT1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC20A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC20A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.