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PI 3-kinase p85β双切口酶质粒(h) | sc-401991-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PI 3-kinase p85β双切口酶质粒(h2) | sc-401991-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PIK3R2 编码 I 类 IA 型磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)的 p85β 调节亚基,可稳定并调控 p110 催化亚型,并将被激活的受体酪氨酸激酶及衔接蛋白连接到下游的 PI3K–AKT–mTOR 信号通路。通过调控 PIP3 的生成,PI3K p85β 影响细胞生长、生存、代谢、细胞骨架动态以及囊泡运输,整合来自胰岛素/IGF 与多种生长因子通路的信号。PI3K 通路调控异常被广泛认为与肿瘤发生信号、代谢紊乱及免疫细胞功能相关,因此 PIK3R2 是解析通路连接方式与反馈调控的重要节点。在科研中,对 PIK3R2 进行扰动有助于开展 PI3K 各同工型的使用偏好、信号强度与终止机制,以及与 MAPK 和 mTOR 复合体之间通路串扰的机制研究。
PI 3-kinase p85β 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PIK3R2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PIK3R2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PIK3R2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PIK3R2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。