PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401043

概述

PIK3CG 编码 IB 类磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）的催化亚基 p110γ，是造血细胞及其他细胞类型中由 GPCR（G 蛋白偶联受体）驱动的磷脂酰肌醇信号传导的关键介导因子。PI3K p110γ 通过磷酸化磷脂酰肌醇类脂质生成 PIP3，从而经由 PDK1、mTOR 以及小 GTP 酶调控因子等下游效应分子，促进 AKT 依赖的细胞存活程序、细胞骨架重塑与定向趋化。该通路整合来自趋化因子受体、补体受体及炎症介质的信号，以调控白细胞活化、迁移与氧爆发。PIK3CG 信号失调与异常炎症反应和免疫细胞功能障碍有关，同时也常在肿瘤—免疫相互作用及微环境信号传导的研究中被关注。

PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PIK3CG基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PIK3CG基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PIK3CG开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PI 3-kinase p110γ蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建PIK3CG缺失的细胞模型，用于PI 3-kinase p110γ信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 PI 3-kinase p110γ 功能至关重要的 PIK3CG 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 PIK3CG 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PIK3CG 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 PI 3-kinase p110γ HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 PI 3-kinase p110γ HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PIK3CG同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PIK3CG靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。