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PI 3-kinase p110β双切口酶质粒(m) | sc-428980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PI 3-kinase p110β双切口酶质粒(m2) | sc-428980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pik3cb 编码 I 类A型磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)的催化亚基 p110β。p110β 是一种脂质激酶,可将 PIP2 磷酸化生成 PIP3,从而传递并放大 PI3K–AKT 信号。在小鼠细胞中,p110β 参与生长因子受体以及与 GPCR 偶联的信号传导,协调细胞存活、增殖、代谢、囊泡运输和细胞骨架动态等下游过程。它与调节亚基 p85 协同作用,以控制通路信号强度及其空间分布。PI3K 通路成分的失调(包括 p110β 活性异常)被广泛研究,常见于异常细胞生长、代谢表型改变以及免疫相关信号缺陷等背景中。
PI 3-kinase p110β 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pik3cb 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pik3cb内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pik3cb的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pik3cb基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。