Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110β (h): sc-400541
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PI 3-kinase p110β Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PI 3-kinase p110β, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PI 3-kinase p110β Antibody (C-8): sc-376641
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110β (h) | sc-400541 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PIK3CB code pour la sous-unité catalytique p110β de la phosphoinositide 3‑kinase (PI3K) de classe I, qui phosphoryle le PIP2 pour générer du PIP3 et transmettre les signaux en aval d’AKT–mTOR et d’autres nœuds effecteurs. La PI3K p110β joue un rôle majeur dans la signalisation initiée par les récepteurs à activité tyrosine kinase et les RCPG, en intégrant des signaux qui régulent la prolifération, la survie, le métabolisme, la dynamique du cytosquelette et le trafic vésiculaire. Dans les cellules humaines, une activité altérée de la voie PI3K est fréquemment associée à une signalisation oncogénique, à des mécanismes de résistance aux traitements et à des réponses immunitaires et inflammatoires aberrantes. La fonction de PIK3CB est également pertinente pour la signalisation de l’insuline/IGF et les programmes de motilité cellulaire, ce qui en fait une cible largement étudiée en cartographie des voies et en génomique fonctionnelle.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110β (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PIK3CB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PIK3CB, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PIK3CB à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PI 3-kinase p110β.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PIK3CB pour l'étude de la signalisation de PI 3-kinase p110β, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PIK3CB essentiels à la fonction de PI 3-kinase p110β
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PIK3CB pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PI 3-kinase p110β plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PI 3-kinase p110β plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PIK3CB. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PI 3-kinase p110β plasmide HDR (h) et le PI 3-kinase p110β (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PIK3CB pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PIK3CB définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.