PHC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407705-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PHC2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PHC2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PHC2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PHC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PHC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407705-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407705-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHC2 codifica o homólogo 2 de Polyhomeotic, uma subunidade central do complexo repressor Polycomb 1 (PRC1) que ajuda a manter o silenciamento transcricional estável por meio da compactação da cromatina e da ubiquitinação da lisina 119 da H2A. Ao contribuir para a memória epigenética, o PHC2 auxilia o controle de programas de expressão gênica do desenvolvimento, a especificação de linhagens e a regulação de longo prazo da identidade celular. A desregulação de proteínas do grupo Polycomb, incluindo o PHC2, está associada a estados de diferenciação alterados e proliferação aberrante, tornando o PHC2 um alvo relevante para estudos de regulação gênica baseada na cromatina. Assim, o PHC2 é comumente investigado no contexto de redes de repressão transcricional e de vias dependentes de PRC1 que modulam a organização do genoma.
PHC2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PHC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PHC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PHC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PHC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.