Plasmide CRISPR/Cas9 KO Peptide YY (h): sc-403446
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Peptide YY Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Peptide YY, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Peptide YY Antibody (029-01-1): sc-80499
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Peptide YY (h) | sc-403446 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PYY code le peptide YY, un peptide endocrinien d’origine intestinale sécrété principalement par les cellules L entéroendocrines en réponse à l’apport de nutriments, puis transformé en formes bioactives qui signalent via des membres de la famille des récepteurs du neuropeptide Y, notamment Y2. Le peptide YY module la motilité et les sécrétions gastro-intestinales, ainsi que les signaux de satiété au sein des circuits de l’axe intestin–cerveau, en intégrant des signaux entéroendocrines avec les voies hypothalamiques et vagales. Par ces processus médiés par des récepteurs de type GPCR, PYY contribue à l’homéostasie énergétique et à la régulation métabolique, et des profils d’expression altérés ont été associés à l’obésité, au diabète de type 2 et à des troubles gastro-intestinaux. PYY est également utilisé comme marqueur dans des études de différenciation entéroendocrine et de biologie de l’épithélium intestinal.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Peptide YY (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PYY dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PYY, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PYY à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Peptide YY.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PYY pour l'étude de la signalisation de Peptide YY, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PYY essentiels à la fonction de Peptide YY
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PYY pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Peptide YY plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Peptide YY plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PYY. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Peptide YY plasmide HDR (h) et le Peptide YY (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PYY pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PYY définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.