PELP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405376-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PELP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PELP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PELP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PELP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PELP1 Anticorpo (E-1): sc-390599
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PELP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405376-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PELP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405376-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PELP1 (proteína 1 rica em prolina, ácido glutâmico e leucina) é um correceptor (coregulador) de receptores nucleares que integra a sinalização do receptor de estrogênio e de outros receptores de esteroides com a remodelação da cromatina e o controle transcricional. Atua como uma plataforma (scaffold) para complexos que conectam a expressão gênica dirigida por receptores à progressão do ciclo celular, à biogênese de ribossomos e às vias de resposta a danos no DNA, e pode transitar entre os compartimentos nuclear e citoplasmático para modular a sinalização por quinases. Por meio dessas interações, a PELP1 contribui para programas de transcrição responsivos a hormônios e para redes regulatórias mais amplas que influenciam proliferação, sobrevivência e estabilidade do genoma. A expressão ou a localização desregulada de PELP1 tem sido associada à alteração da sinalização oncogênica e à progressão em múltiplos contextos de câncer, sustentando seu uso como alvo mecanístico em estudos focados em vias.
PELP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PELP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PELP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PELP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PELP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.