Peg1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421634-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Peg1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Peg1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Peg1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mest. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Peg1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421634-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Mest, também conhecido como Peg1, é um gene submetido a imprinting que codifica uma proteína associada à membrana, implicada no desenvolvimento embrionário e placentário, na diferenciação de adipócitos e na regulação do crescimento. A atividade de Peg1/MEST tem sido relacionada a mecanismos de controle epigenético, incluindo expressão específica do progenitor de origem e metilação do DNA em regiões de controle de imprinting, que influenciam programas de transcrição durante o desenvolvimento. A alteração da expressão de Mest/MEST ou do seu estado de imprinting está associada a crescimento fetal anormal, insuficiência placentária e fenótipos metabólicos, como mudanças na adiposidade. Na biologia do câncer, a desregulação de MEST tem sido descrita como uma característica de reprogramação epigenética associada a tumores, tornando-o relevante para estudos de imprinting, vias de desenvolvimento e transições de estado celular.
Peg1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mest em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mest. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mest. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mest interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.