PDGF Receptor alpha/PDGFRA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400107-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDGF Receptor alpha/PDGFRAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDGF Receptor alpha/PDGFRA (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDGF Receptor alpha/PDGFRA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PDGFRA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDGF Receptor alpha/PDGFRA Anticorpo (C-9): sc-398206
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDGF Receptor alpha/PDGFRA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDGF Receptor alpha/PDGFRA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDGFRA codifica o receptor alfa do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRα), uma tirosina quinase receptora que se liga a ligantes PDGF para iniciar a dimerização e a autofosforilação. O PDGFRα ativado aciona redes de sinalização a jusante, incluindo as vias PI3K–AKT, RAS–MAPK e PLCγ, coordenando proliferação, sobrevivência, migração e diferenciação de linhagens mesenquimais. A atividade de PDGFRA contribui para a comunicação estroma–epitélio e para a remodelação da matriz extracelular durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual. A sinalização desregulada de PDGFRA e alterações estruturais estão implicadas em programas de crescimento oncogênico e em remodelação fibrótica, o que faz dele um alvo frequente em estudos de biologia de tirosina quinases receptoras e de sinalização no microambiente tumoral.
PDGF Receptor alpha/PDGFRA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PDGFRA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PDGFRA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PDGFRA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PDGFRA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.