PCID2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406324

概要

PCID2（PCI domain containing 2）は、RNA代謝や遺伝子発現制御を担う大型の多タンパク質複合体の組み立ておよび調節に関与するとされるPCIドメインタンパク質をコードします。PCID2は、mRNAの監視機構や分解（ターンオーバー）など、転写後制御プロセスとの関連が示されており、細胞の恒常性を形作るプロテオスタシス関連経路の文脈でも研究されています。これらのプロセスが攪乱されると、転写産物の安定性やタンパク質産生量が変化し、細胞周期の進行、ストレス応答、分化プログラムに影響を及ぼし得ます。RNAプロセシングや品質管理ネットワークの破綻は、がん化状態やその他の複雑疾患としばしば関連するため、PCID2は遺伝子制御回路の機構解明研究に有用な標的となります。

PCID2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPCID2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PCID2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PCID2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PCID2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PCID2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PCID2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PCID2の機能に不可欠なPCID2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PCID2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PCID2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPCID2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PCID2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PCID2 HDRプラスミド（h）および PCID2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPCID2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPCID2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。