Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PCAF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400753-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PCAFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PCAF (h) e o Plasmídeo Double Nickase PCAF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KAT2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PCAF Anticorpo (E-8): sc-13124
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PCAF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400753-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PCAF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400753-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KAT2B codifica a acetiltransferase de histonas PCAF, um coativador da família GNAT que acetila histonas e substratos não histônicos para regular a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais. A PCAF participa do controle transcricional por meio de interações com complexos multiproteicos e fatores de transcrição, influenciando processos como respostas a danos no DNA, progressão do ciclo celular, diferenciação e sinalização de estresse. Ao modular a expressão gênica dependente de acetilação, a PCAF contribui para vias frequentemente alteradas no câncer e em outros distúrbios caracterizados por desregulação epigenética. Assim, a PCAF humana é um nó útil para estudos mecanísticos que conectam remodelamento de cromatina a resultados transcricionais específicos do contexto.
PCAF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KAT2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KAT2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KAT2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KAT2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.