Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Pax-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422115
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pax-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pax-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pax-2 Anticorpo (60-P): sc-130387
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pax-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422115 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Pax2 de camundongo codifica a Pax-2, um fator de transcrição do tipo paired box que regula programas de expressão gênica durante a organogênese, particularmente no rim em desenvolvimento, no nervo óptico/retina e no ouvido interno. A Pax-2 atua na especificação de linhagens e na diferenciação epitelial ao coordenar redes transcricionais do desenvolvimento e o crosstalk com vias como a sinalização WNT e Notch. Alterações na atividade de PAX2 estão associadas a anomalias congênitas do rim e do trato urinário e a defeitos do desenvolvimento ocular, tornando Pax2 um marcador amplamente utilizado e um nó mecanístico em estudos de desenvolvimento e de modelagem de doenças. Em sistemas celulares, a Pax-2 influencia a proliferação, a morfogênese e a manutenção da identidade específica de tecidos por meio de ligação direta ao DNA e de complexos de repressão/ativação transcricional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pax-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pax2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pax2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pax2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pax-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pax2 para a investigação da sinalização de Pax-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pax2 críticos para a função Pax-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pax2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pax-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Pax-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pax2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pax-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Pax-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pax2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pax2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.