PAOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406710

Visão geral

O PAOX humano codifica a poliamina oxidase, uma enzima dependente de flavina que catalisa a reconversão de poliaminas acetiladas, contribuindo para a homeostase celular de poliaminas e para a regulação dos pools intracelulares de espermidina e espermina. A atividade do PAOX conecta o catabolismo de poliaminas à biologia redox por meio da produção de peróxido de hidrogênio e aldeídos reativos, influenciando respostas ao estresse oxidativo, a função mitocondrial e uma adaptação metabólica mais ampla. Por esses mecanismos, o PAOX é estudado em vias que governam a proliferação celular, a diferenciação e a sinalização induzida por estresse. Alterações no metabolismo de poliaminas e subprodutos oxidativos associados ao PAOX são frequentemente investigados no contexto da biologia do câncer, da neurodegeneração e de processos inflamatórios como correlatos moleculares de crescimento desregulado e dano celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAOX (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAOX em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAOX, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAOX na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAOX.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAOX para a investigação da sinalização de PAOX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAOX críticos para a função PAOX
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAOX para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PAOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PAOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAOX. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PAOX Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PAOX (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAOX para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAOX definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.